The present invention relates to methods of culturing adherent cells, in particular adherent stem cells, to confluency at a liquid-liquid interface. The invention also provides cell culture systems useful in the culture of cells at liquid-liquid interfaces. The cell culture systems generally comprise an aqueous cell culture medium and an oil phase, there being a conditioning layer disposed between the cell culture medium and the oil phase comprising a peptide or polymer layer and a surfactant that assists in the culture of the adherent cells (in particular stem cells) at the interface between the two phases.La présente invention concerne des procédés de culture de cellules adhérentes, en particulier de cellules souches adhérentes, jusqu'à la confluence au niveau d'une interface liquide-liquide. L'invention fournit également des systèmes de culture de cellules utiles dans la culture de cellules au niveau d'interfaces liquide-liquide. Les systèmes de culture de cellules comprennent généralement un milieu de culture de cellules aqueux et une phase huileuse, où une couche de conditionnement est disposée entre le milieu de culture de cellules et la phase huileuse est présente et comprend une couche peptidique ou polymère et un tensioactif qui facilite la culture des cellules adhérentes (en particulier des cellules souches) au niveau de l'interface entre les deux phases.