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一种组织型纤溶酶原激活剂的构建、表达纯化及功能鉴定
- 专利权人:
- 重庆医科大学
- 发明人:
- 汪德强,周建中,龙小滨,够怡然,白垒,黄爱龙,张宏鹏,杨可,陈检
- 申请号：
- CN201410389379.X
- 公开号：
- CN104479025A
- 申请日:
- 2014.08.08
- 申请国别(地区):
- CN
- 年份:
- 2015
- 代理人:
- 摘要：
- 一种重组组织型纤溶酶原激活剂，即r-tPA，重组质粒的构建及其原核上清表达及纯化方法，它涉及组织型纤溶酶原激活剂重组质粒的构建、原核表达及纯化技术；本发明在含有人tPA全长基因质粒基础上在N端引入能去除载体上标签的3C序列，C端引入提高靶向性的RGDS序列，以PQE30为载体构建PQE30-rt-PA重组质粒，再通过自诱导方法诱导表达，采用超声法破菌处理后，用Ni2+亲和层析柱纯化r-tPA蛋白，然后用再用PreScission蛋白酶切除融合蛋白上的3C短肽，从而去除His-Tag标签，再用分子筛进一步纯化，得到高纯度的r-tPA蛋白；其用于制备具有特异性溶解血栓的溶栓药物。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
