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一种利用CRISPR/Cas9系统对紫花苜蓿基因定点突变的方法
- 专利权人:
- 广东三杰牧草生物科技有限公司
- 发明人:
- 陈海涛,王文,谢雄平,邱强,尚占环,苏克先,何辉
- 申请号：
- CN201810724589.8
- 公开号：
- CN108866093A
- 申请日:
- 2018.07.04
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2018
- 代理人:
- 赛晓刚`方金敏
- 摘要：
- 本发明公开一种利用CRISPR/Cas9系统对紫花苜蓿基因定点突变的方法。首先构建双元表达载体MsCRISPR/Cas9；对目标基因设计并构建载体；然后使用根癌农杆菌介导转化，实现对特定基因的定点突变，通过筛选获得目的基因被敲除的突变体转化植株。本发明首次在异花授粉的同源四倍体植物紫花苜蓿中使用CRISPR/Cas9技术，并获得突变植株；首次使用MtU6启动子在紫花苜蓿中启动sgRNA转录，提高转录效率；突变率能达到52％；本发明直接在基因编码序列上进行突变，为在紫花苜蓿中进行基因编辑开辟了新的领域，为后续同时沉默多个基因、染色体大片段缺失、外源基因精准插入靶点、基因调控等奠定技术基础。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
