一种利用CRISPR‑Cas9靶向敲除MSTN基因的方法
- 专利权人:
- 广西壮族自治区水牛研究所
- 发明人:
- 朱鹏,梁贤威,庞春英,邓廷贤,段安琴,陆杏蓉
- 申请号:
- CN201610470813.6
- 公开号:
- CN106119283A
- 申请日:
- 2016.06.24
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2016
- 代理人:
- 但玉梅
- 摘要:
- 本发明公布了一种利用CRISPR‑Cas9靶向敲除MSTN基因的方法,该方法通过对多物种进行同源对比选取两对MSTN基因靶序列,利用gRNA的PAM设计原则,合成两对靶序列不同,表达的蛋白相同,带有相同BsmBI粘性末端的DNA双链,将双链与pPDNA330质粒进行连接得到携带有多物种的MSTN同源基因的重组载体,重组载体利用荧光蛋白表达法对基因敲除效率进行检测,选择敲除效率更高的载体转染多物种受体细胞,进行基因敲除并验证,完成对多物种MSTN基因进行简单、高效、精确的基因敲除。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心