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一种利用CRISPR-Cas9靶向敲除ALK6基因的方法
专利权人:
广西壮族自治区水牛研究所
发明人:
朱鹏,梁贤威,庞春英,邓廷贤,段安琴,陆杏蓉
申请号:
CN201610471338.4
公开号:
CN105925608A
申请日:
2016.06.24
申请国别(地区):
中国
年份:
2016
代理人:
但玉梅
摘要:
本发明公布了一种利用CRISPR‑Cas9靶向敲除ALK6基因的方法,该方法通过对多物种进行同源对比选取两对ALK6基因靶序列,利用gRNA的PAM设计原则,合成两对靶序列不同,表达的蛋白相同,带有相同BsmBI粘性末端的DNA双链,将双链与pPDNA330质粒进行连接得到携带有多物种的ALK6同源基因的重组载体,重组载体利用荧光蛋白表达法对基因敲除效率进行检测,选择敲除效率更高的载体转染多物种受体细胞,进行基因敲除并验证,完成对多物种ALK6基因进行简单、高效、精确的基因敲除。
来源网站:
中国工程科技知识中心
来源网址:
http://www.ckcest.cn/home/

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