SUMITOMO CHEMICAL COMPANY, LIMITED;RIKEN; LIMITED;国立研究開発法人理化学研究所;SUMITOMO CHEMICAL COMPANY;住友化学株式会社
发明人:
KUWAHARA, Atsushi,桑原 篤,桑原 篤
申请号：
JPJP2014/077602
公开号：
WO2015/087614A1
申请日:
2014.10.16
申请国别(地区):
JP
年份:
2015
代理人:
摘要：
The present invention provides a method for manufacturing a cell aggregate containing a ciliary marginal zone-like structure, the method comprising a step for culturing a retinal tissue-containing cell aggregate, wherein the percentage of Chx10-positive cells present in the retinal tissue is 20% to 100%, in a serum-free medium or serum medium containing a Wnt signal pathway-affecting substance and a FGF signal pathway-inhibiting substance only in the period until cells expressing RPE65 gene appear, and then the obtained "cell aggregates in which RPE65 gene-expressing cells have not appeared" are cultured in a serum-free medium or serum medium that does not contain a Wnt signal pathway-affecting substance. The manufacturing method according to the present invention makes it possible to manufacture ciliary marginal zone-like structures with high efficiency.La présente invention porte sur un procédé pour la fabrication d'un agrégat cellulaire contenant une structure analogue à la zone marginale ciliaire, le procédé comprenant une étape de culture d'un agrégat cellulaire contenant du tissu rétinien, le pourcentage de cellules Chx10-positives présentes dans le tissu rétinien étant de 20 % à 100 %, dans du milieu sans sérum ou du milieu avec sérum contenant une substance ayant une incidence sur la voie de signalisation Wnt et une substance inhibant la voie de signalisation de FGF seulement pendant la période jusqu'à ce que des cellules exprimant le gène RPE65 apparaissent, et ensuite les « agrégats cellulaires dans lesquels des cellules exprimant le gène RPE65 ne sont pas apparues » ainsi obtenus sont cultivés dans du milieu sans sérum ou du milieu avec sérum qui ne contient pas une substance ayant une incidence sur la voie de signalisation Wnt. Le procédé de fabrication selon la présente invention permet de fabriquer des structures analogues à la zone marginale ciliaire avec un haut rendement.本発明は、網膜組織を含む細胞凝集体であり、前記網膜組織におけるChx10陽性細胞の存在割合が20%以上100%以下である細胞凝集体を、Wntシグナル経路作用物
