The present invention relates to a method for preparing tumour-specific T cells, comprising the steps of: providing a tumour sample obtained from a patient, wherein the tumour sample comprises T cells that infiltrated the tumour； isolating T regulatory cells from the tumour sample, selecting at least one clonotype of the isolated T regulatory cells, determining the T cells receptor sequence of the selected clonotype, providing T cells other than T regulatory cells of patient, and transducing T cells other than T regulatory cells obtain from said patient with the determined TCR sequence of selected clonotype thereby yielding tumour specific T cells.La présente invention concerne un procédé de préparation de lymphocytes T spécifiques d'une tumeur, comprenant les étapes consistant à : fournir un échantillon tumoral provenant d'un patient, l'échantillon tumoral comportant des lymphocytes T qui ont infiltré la tumeur ； isoler les lymphocytes T régulateurs de l'échantillon tumoral, sélectionner au moins un clonotype des lymphocytes T régulateurs isolés, déterminer la séquence de récepteurs des lymphocytes T du clonotype sélectionné, fournir des lymphocytes T autres que les lymphocytes T régulateurs du patient, et transduire les lymphocytes T autres que les lymphocytes T régulateurs provenant dudit patient avec la séquence TCR déterminée du clonotype sélectionné, ce qui permet d'obtenir des lymphocytes T spécifiques d'une tumeur.
