A method of isolating exosomes from a biological sample is provided. The method includes the steps of: i) exposing the biological sample to a first centrifugation to remove cellular debris greater than about 7-10 microns in size from the sample and obtaining the supernatant following centrifugation ii) subjecting the supernatant from step i) to centrifugation to remove microvesicles therefrom iii) microfiltering the supernatant from step ii) and collecting the microfiltered supernatant iv) subjecting the microfiltered supernatant from step iii) to at least one round of ultracentrifugation to obtain an exosome pellet and v) re-suspending the exosome pellet from step iv) in a physiological solution and conducting a second ultracentrifugation in a density gradient and remove the exosome pellet fraction therefrom. The method advantageously results in exosomes that maintain integrity, stability and are essentially free from contaminating particles.Cette invention concerne un procédé disolement dexosomes à partir dun échantillon biologique. Le procédé comprend les étapes suivantes : i) lexposition de léchantillon biologique à une première centrifugation pour éliminer les débris cellulaires dune taille supérieure à environ 7-10 microns de léchantillon et la récupération du surnageant obtenu après centrifugation ii) la soumission du surnageant de létape i) à centrifugation pour en éliminer les microvésicules iii) la microfiltration du surnageant de létape ii) et le recueil du surnageant microfiltré iv) la soumission du surnageant microfiltré de létape iii) à au moins un tour dultracentrifugation pour obtenir un culot dexosomes et v) la remise en suspension du culot dexosomes de létape iv) dans une solution physiologique et la mise en œuvre dune seconde ultracentrifugation sur gradient de densité et la récupération de la fraction correspondant au culot dexosomes. Le procédé permet dobtenir avantageusement des exosomes qui conservent leur intégrité, leur stabilité et sont
