Methods and compositions for evaluating CRISPR / Cas-mediated destruction or deletion in vivo and CRISPR / Cas-induced recombination with exogenous donor nucleic acids
공 궈춘,헌트 샤를렌,브릿지스 수산나,하트포드 수잔느,프렌데웨이 데이빗,잠브로비츠 브라이언,머피 앤드류 제이.
申请号：
KR1020207001975
公开号：
KR1020200033259A
申请日:
2018.07.31
申请国别(地区):
KR
年份:
2020
代理人:
摘要：
Methods and compositions are provided for the evaluation of CRISPR / Cas-mediated non-homologous end junction (NHEJ) activity of target genomic loci in vivo or ex vivo and / or CRISPR / Cas-induced recombination with exogenous donor nucleic acids. The methods and compositions are for detecting and measuring deletion of a sequence between two CRISPR / Cas nuclease cleavage sites or destruction of a sequence close to a CRISPR / Cas nuclease cleavage site and / or coding for the first reporter protein A non-human animal comprising a CRISPR reporter, such as a CRISPR reporter integrated genomically to measure CRISPR / Cas-induced recombination of a CRISPR reporter with an exogenous donor nucleic acid of the CRISPR reporter to convert the sequence to a coding sequence for a different second reporter protein. Use Methods and compositions for making and using these non-human animals are also provided.생체내에서 또는 생체외에서 표적 게놈 유전자좌의 CRISPR/Cas-매개된 비상동성 단부 접합 (NHEJ) 활성 및/또는 외인성 도너 핵산과의 CRISPR/Cas-유도된 재조합의 평가를 위한 방법 및 조성물이 제공된다. 이 방법 및 조성물은 2개의 CRISPR/Cas 뉴클레아제 절단 부위 사이의 서열의 삭제 또는 CRISPR/Cas 뉴클레아제 절단 부위에 가까운 서열의 파괴를 검출 및 측정하기 위한 및/또는 제1 리포터 단백질에 대한 코딩 서열을 상이한 제2 리포터 단백질에 대한 코딩 서열로 전환시키기 위한 CRISPR 리포터의 외인성 도너 핵산과의 CRISPR/Cas-유도된 재조합을 측정하기 위한 게놈상으로 통합된 CRISPR 리포터와 같은 CRISPR 리포터를 포함하는 비인간 동물을 사용한다. 이들 비인간 동물을 제조 및 사용하는 방법 및 조성물이 또한 해 제공된다.
