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一种TYMV病毒诱导的十字花科内源基因沉默方法及其应用
- 专利权人:
- 南京农业大学
- 发明人:
- 侯喜林,张昌伟,高立伟,俞静,刘唱,刘同坤,李英,郭明亮,肖栋,杨洋
- 申请号：
- CN201710789234.2
- 公开号：
- CN107557383A
- 申请日:
- 2017.09.05
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2018
- 代理人:
- 徐冬涛`杜静
- 摘要：
- 本发明公开了一种TYMV病毒诱导的十字花科内源基因沉默方法及其应用,以目标基因cDNA为模板进行PCR扩增，纯化连接载体，转化大肠杆菌，阳性克隆测序得到目的编码区全长CDS序列；根据测序后的结果选择序列为(T/A/G/C)TGA或(T/A/C)TAG或(T/A/C)TAA向后选择40bp序列；3’端加上其反向互补序列，两端再加入和线性化载体两端对应的同源序列长度为15bp的序列，合成双链DNA片段并与载体pTY‑s融合连接，融合连接产物转化大肠杆菌，培养提取质粒，选择幼苗第一片真叶长出时，基因枪轰击，快速转入栽培土中培养。本发明载体构建容易，转染效率高，基因沉默效果明显，性状持久。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
