本发明涉及分子生物学技术领域,具体涉及分枝杆菌噬菌体裂解酶Lysin‑Guo1的制备与应用。本发明提供一种分枝杆菌噬菌体裂解酶的制备与应用。本发明提供一种抑菌剂,其主要活性成分为分枝杆菌噬菌体裂解酶Lysin‑Guo1、含有Lysin‑Guo1表达元件的载体、含有Lysin‑Guo1表达元件的表达盒或含有Lysin‑Guo1表达元件的宿主细胞中的至少一种,Lysin‑Guo1具有如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列。本发明还提供了分枝杆菌噬菌体裂解酶Lysin‑Guo1的制备方法。该裂解酶蛋白Lysin‑Guo1能够裂解多种结核分枝杆菌,还发现该裂解酶对其他细菌包括大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌也具有一些抑制作用。本发明为耐药结核菌的抗痨替代疗法打下了基础。