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LELIA (Liposome-basedEnzyme-LinkedImmunoAssay) technology using recombinant proteoliposomes
专利权人:
株式会社リポソーム工学研究所
发明人:
吉村 哲郎
申请号:
JP2013520580
公开号:
JPWO2012173184A1
申请日:
2012.06.14
申请国别(地区):
JP
年份:
2015
代理人:
摘要:
[Problem] To provide LELIA (Liposome-based Enzyme-Linked ImmunoAssay), which is a method for measuring trace substances that have been difficult to detect by using a recombinant proteoliposome and sufficiently reducing the baseline. To do. [MEANS FOR SOLVING PROBLEMS] (1) Container adsorption in which a recombinant proteoliposome produced by fusing a recombinant baculovirus budding virus expressing a membrane protein and a liposome in a first container is adsorbed on the wall of the container A step, (2) a first washing step, (3) a membrane protein binding substance binding step for binding a membrane protein and a membrane protein binding substance in a liquid phase in the first container, and (4) a second washing step. (5) a first antibody binding step in which a primary antibody that recognizes a membrane protein binding substance is added to react with the membrane protein binding substance bound to the membrane protein, (6) a third washing step, (7) primary Add an enzyme-labeled secondary antibody that binds to the antibody and react with the primary antibody. (8) Add a fourth washing step. (9) Add a solution to suspend the recombinant proteoliposome. And after the transfer process, and (10) method of measuring membrane protein binding agent, characterized in that it comprises a detection step transferring the solution to a second container.【課題】組換えプロテオリポソームを用いると共に、ベースラインを十分に減少させることによって、従来には検出が困難であった微量物質を測定する方法であるLELIA(Liposome-based Enzyme-Linked ImmunoAssay)を提供すること。【解決手段】(1)第1の容器中に膜タンパク質を発現した組換えバキュロウイルス出芽ウイルスとリポソームとを融合させて製造した組換えプロテオリポソームを添加して、容器の壁面に吸着させる容器吸着工程、(2)第1の洗浄工程、(3)第1の容器中の液相において、膜タンパク質と膜タンパク質結合物質とを結合させる膜タンパク質結合物質結合工程、(4)第2の洗浄工程、(5)膜タンパク質結合物質を認識する一次抗体を添加して、膜タンパク質に結合した膜タンパク質結合物質と反応させる第1の抗体結合工程、(6)第3の洗浄工程、(7)一次抗体に結合する酵素標識二次抗体を添加して、一次抗体と反応させる第2の抗体結合工程、(8)第4の洗浄工程、(9)溶液を添加し、組換えプロテオリポソームを懸濁した後、この溶液を第2の容器に移す移送工程、および(10)検出工程を備えることを特徴とする膜タンパク質結合物質の測定方法。
来源网站:
中国工程科技知识中心
来源网址:
http://www.ckcest.cn/home/

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