本发明公开了一种本氏烟NbWhirly1基因在调控植物抗双生病毒中的应用及转基因植物培育方法,所述双生病毒为双生病毒科菜豆金色花叶病毒属的TYLCCNV/TYLCCNB病毒和TYLCV病毒,NbWhirly1基因的序列如SEQ ID NO:19所示。本发明通过烟草叶盘农杆菌转化的方法,将携带NbWhirly1基因片段构建到RNAi载体上,获得了NbWhirly1RNAi载体,通过农杆菌转化的方法转化目的植物,获得了沉默NbWhirly1的转基因本氏烟。获得的沉默NbWhirly1的转基因本氏烟能够显著抑制TYLCCNV/TYLCCNB病毒和TYLCV病毒的侵染。