本发明公开了一种金叶银中杨的PaGLK基因及应用,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。还公开金叶银中杨的创制方法,包括:克隆PaGLK基因;根据该基因保守序列设计特异性引物Ⅰ和特异性引物Ⅱ,PCR扩增分别获取靶向DNA序列和靶向DNA反向互补序列;将pFGC5941载体和靶向DNA序列分别双酶切后,连接获取pFGC5941‑Cis载体;将pFGC5941‑Cis载体和靶向DNA反向互补序列分别双酶切后,连接获取pGLK‑RNAi载体,将该载体采用农杆介导法转化到银中杨中,获得金叶银中杨。通过构建含PaGLK基因表达载体,使PaGLK基因在转基因银中杨中低量表达,叶片呈黄色,为育种提供基础。