本发明公开了一株具有促排便功能的鼠李糖乳杆菌NSL0401及其应用。所述鼠李糖乳杆菌NSL0401的分类命名为鼠李糖乳杆菌Lactobacillus rhamnosus,保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CTCC M 2021627,其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。所述鼠李糖乳杆菌NSL0401无致病性,不具有急性毒性,安全可靠,且经实验验证,鼠李糖乳杆菌NSL0401能够有效改善机体的排便参数,增加排便次数和粪便含水量,促进体内益生菌的种类和增殖,并增加多种短链脂肪酸的浓度,进而起到促进排便,缓解或治疗弛缓性便秘的作用,并增强机体的肠道功能和健康情况。