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一种基于酵母表面展示的分选酶检测的方法
- 专利权人:
- 华南理工大学
- 发明人:
- 罗立新,吴琳,朱芳,江彬强,林影
- 申请号：
- CN200910040618.X
- 公开号：
- CN101603075A
- 申请日:
- 2009.06.26
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2009
- 代理人:
- 何淑珍
- 摘要：
- 本发明公开了一种基于毕赤酵母表面展示分选酶底物的分选酶检测方法，包括下列步骤：A.将目的基因QALPETGEE与linker-eGFP基因融合成QALPETGEE-linker-eGFP；B.构建QALPETGEE-linker-eGFP表达载体的构建；C.表达载体pKFS-QALPETGEE-linker-eGFP转化至毕赤酵母；D.酵母表面蛋白的表达：将阳性转化子分别经过YPD和BGMY液体培养基转接培养，然后在BMMY液体培养基中诱导表达；E.酵母表面蛋白的检测；F.分选酶的表达；G.分选酶活性检。本发明利用酵母表面展示技术，然后用荧光分光光度计和流式细胞仪检测，所用到的物质价格比较低，大大降低了分选酶活性测定的成本，且操作简便。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
