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一种Qβ-2aa噬菌体病毒样颗粒蛋白的制备方法及其用途
- 专利权人:
- 华中科技大学同济医学院附属协和医院
- 发明人:
- 陈霄,周子华,廖玉华,陈芬,王敏,刘祖霞,邱志华,张晓丽
- 申请号:
- CN201010028904.7
- 公开号:
- CN101921733B
- 申请日:
- 2010.01.05
- 申请国别(地区):
- CN
- 年份:
- 2013
- 代理人:
- 摘要:
- 一种Qβ-2aa噬菌体病毒样颗粒蛋白,按如下方法制备:步骤1)将Qβ噬菌体CP蛋白基因终止密码子由TGA突变为强终止密码子TAA后,克隆至原核表达载体pET28a(+)中,得到编码CP蛋白质粒pETQβ-CP;步骤2)在Qβ噬菌体CP延伸蛋白基因中编码免疫优势决定区位置,即Qβ噬菌体CP延伸蛋白基因第72位至73位密码子间,插入编码赖氨酸和亮氨酸的核苷酸AAGCTT,并将CP蛋白基因终止密码子由TGA突变为GGA后克隆至原核表达载体PGEX4T-2中,得到编码A1蛋白质粒pGEXQβ-A1;步骤3)突变后编码Qβ噬菌体CP蛋白质粒与A1蛋白质粒共同转化大肠杆菌,诱导后表达得到病毒样颗粒蛋白Qβ-2aa。使用异双功能交联剂将短肽抗原耦联至Qβ-2aa噬菌体病毒样颗粒。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/