一种制备重组耐热β-葡萄糖醛酸酶的方法
- 专利权人:
- 南京师范大学
- 发明人:
- 邵蔚蓝,裴建军,王卓
- 申请号：
- CN200810018772.2
- 公开号：
- CN101250539B
- 申请日:
- 2008.01.23
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2011
- 代理人:
- 卢亚丽
- 摘要：
- 一种制备重组极耐热性β-葡萄糖醛酸酶的方法，其制法是：将耐热β-葡萄糖醛酸酶基因插入表达载体pHsh，转化大肠杆菌获得耐热β-葡萄糖醛酸酶表达质粒；其次是对基因进行诱变，改变mRNA的二级结构，得到优化的耐热β-葡萄糖醛酸酶表达质粒；然后将耐热β-葡萄糖醛酸酶表达质粒或优化的耐热β-葡萄糖醛酸酶表达质粒转化大肠杆菌，得到基因工程菌，并通过热激诱导，使β-葡萄糖醛酸酶得到超量表达；最后收集细胞，破壁，离心后得到粗酶液，进一步纯化后得到纯酶。本发明首次使用表达载体pHsh对耐热β-葡萄糖醛酸酶的基因进行高效表达，并首次将重组的耐热β-葡萄糖醛酸酶应用于甘草次酸的制备。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
