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一种GyV9环形病毒VP3蛋白制备方法
- 专利权人:
- 扬州大学
- 发明人:
- 叶建强,刘敏,姚晓慧,季星妤,韦芊含,邵红霞,秦爱建,田晓彦,万志敏
- 申请号：
- CN201610937115.2
- 公开号：
- CN106565829A
- 申请日:
- 2016.11.01
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2017
- 代理人:
- 戴朝荣`宁菁
- 摘要：
- 本发明还提供了一种GyV9环形病毒VP3蛋白制备方法，该方法基于重组酶ExnaseTM II将线性化的pGEX‑6p‑1载体与GyV9病毒VP3基因片段PCR产物不经酶切连接反应，直接重组克隆技术；并转化到大肠杆菌，实现VP3蛋白表达；其中，PCR扩增所述的GyV9病毒VP3基因片段时所用引物的核苷酸序列如下：上游引物1：5’‑GTTCCAGGGGCCCATGGATGCGACGGGCAC‑3’；下游引物1：5’‑GTTTTCACCGTCATTACAATCTTGCGCCTT‑3’。该方法简化克隆过程，可快速构建GyV9病毒VP3基因的原核表达载体，实现VP3基因快速克隆表达。本发明获得的GyV9病毒VP3表达及纯化的蛋白，可直接提供VP3蛋白作为GyV9诊断抗原；作为免疫原获得抗VP3多克隆抗体；为开展GyV9流行病学调查提供有效诊断试剂；并为进一步探究VP3生物学功能具有重要意义。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
