一种白菜或青花菜CRISPR-Cas9基因编辑体系基因编辑效率的鉴定方法

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种质资源保护与创制专题

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中文

原文发布日期：

2020-08-18

摘要：

本发明公开了一种白菜或青花菜CRISPR?Cas9基因编辑体系基因编辑效率的鉴定方法。该方法包含以下步骤:(1)利用聚乙烯亚胺修饰的碳纳米管介导的叶片瞬时转化法将CRISPR?Cas9基因编辑载体转化白菜或青花菜叶片；(2)注射后的第三天观察叶片GFP荧光蛋白的表达情况,提取有GFP荧光表达的叶片部位的基因组DNA，扩增编辑位点附近的序列测序验证编辑位点附近是否发生基因编辑,从而鉴定CRISPR?Cas9基因编辑体系的基因编辑效率。本方法解决了白菜和青花菜难以通过农杆菌侵染实现瞬时转化的问题，本发明简单有效地实现了白菜和青花菜的基因编辑，具有实验周期短，转化效率高的优点。