靶向切割猪Y染色体的CRISPR/Cas9载体构建及功能验证

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关键词：

来源：

中国知网

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//agri.nais.net.cn/topic/downloadFile/4902c880-6468-4f11-a331-68ad10e2b2f1

来源地址：

https://kns.cnki.net/kcms2/article/abstract?v=3uoqIhG8C45S0n9fL2suRadTyEVl2pW9UrhTDCdPD66WAgC2De_K_Tu3Pt2kMbFVSbZNz4T1LFnHNxy5JIp_ZsoQvSIOZeQ3&uniplatform=NZKPT

资源所属：

动物营养专题

类型：

学术文献

语种：

中文

原文发布日期：

2023-01-02

摘要：

 【目的】通过CRISPR/Cas9系统对Y染色体多位点切割实现目标染色体的敲除，为实现畜禽性别控制提供新的手段。【方法】以CRISPR/Cas9技术为基础，通过寻找Y染色体上能被sgRNA特异性识别的多拷贝重复序列，并体外切割、定量分析、核型鉴定验证其对靶点的有效性。【结果】所设计的sgRNA能够在体外实现对靶片段的明显切割，且切割效率均达到了50%以上。基因的定量分析结果进一步证明了其在细胞水平切割的有效性，并且簇状重复序列切割效果明显优于散在重复序列。核型鉴定结果也证实了细胞水平猪Y染色体的丢失。【结论】研究结果为后续构建基因敲除猪，实现猪的性别控制奠定了基础。