蜡样芽孢杆菌MBL13-U高效降解牛骨胶原蛋白的基因定位、表达及降解机理的研究

基金项目类型：

国家自然科学基金

基金项目编号：

31401622

来源网站：

国家自然科学基金委员会

来源网址：

http://www.nsfc.gov.cn/

负责人：

刘丽莉

完成单位：

河南科技大学

中文关键词：

牛骨; 胶原蛋白酶; 蜡样芽孢杆菌MBL13-U; 基因定位; 降解机理;

项目类型：

青年科学基金项目

语种：

中文

开始日期：

2015-01-01

结束日期：

2017-12-31

中文摘要：

微生物降解牛骨胶原蛋白被认为是未来有效利用牛骨废弃物的手段之一，然而对于其降解机理的研究目前国内外还鲜有报道。本项目以此为切入点，以选育的高效降解牛骨胶原蛋白的菌株Bacillus cereus MBL13-U为研究对象，对其降解机理进行阐释。首先采用柱层析、电泳等分离纯化技术对菌株所产高酶活的胶原蛋白酶进行纯化分离，并测定其酶学特性与N-末端氨基酸序列；然后利用PCR和生物信息学分析等基因工程技术对胶原蛋白酶的功能基因进行定位、克隆和表达，获得功能基因的序列和安全高效的降解菌株，同时预测酶的结构，揭示酶结构降解牛骨胶原蛋白的功能作用；最后利用光谱学、膜分离、HPLC、电泳和HPLC-MS等对降解产物进行分析、分离与鉴定，阐明胶原蛋白酶降解牛骨胶原蛋白的途径和分子机理。该项目将为解决牛骨废弃物的综合利用提供新的突破口，同时也可为扩展、寻找其他高效降解骨胶原蛋白的基因或菌株研究奠定科学基础。