以海洋线虫为模型动物的环境雌激素活体筛选

基金项目类型：

国家自然科学基金

基金项目编号：

30671618

来源网站：

国家自然科学基金委员会

来源网址：

http://www.nsfc.gov.cn/

负责人：

汝少国

完成单位：

中国海洋大学

中文关键词：

Chromadorina germanica; 久效磷; VTG，VIT，原位杂交;

其他语种关键词：

Chromadorina germanica; monocrotophos; vitellogenin; vit; in situ hybridization

项目类型：

面上项目

语种：

中文

开始日期：

2007-01-01

结束日期：

2009-12-31

中文摘要：

以玉米琼脂培养基为载体，在实验室成功地分离并单种传代培养了Chromadorina sp.，经鉴定为细小色毛线虫Chromadorina germanica。久效磷对细小色毛线虫24、48、96 h-LC50分别为66.42、36.94、16.03 μmol/L，1.0 μmol/L久效磷暴露组子一代的数量急剧减少，仅是对照组的52.9%，10 μmol/L暴露组则完全抑制了产卵和子一代的产生。久效磷对细小色毛线虫胚胎发育持续时间的延长和精子、卵子质量下降是导致子一代数量急剧减少的主要原因之一。提取线虫总RNA，RT-PCR获得cDNA，进行vit基因的PCR扩增，获得525bp的部分基因序列，其序列与秀丽隐杆线虫vit-6核苷酸序列具有最高的同源性。根据VTG基因vit-6的序列，设计地高辛标记的寡核苷酸探针，NBT/BCIP化学法显色，原位杂交结果表明对照组雌虫呈紫褐色， 而对照组雄虫不显色，久效磷暴露组不管雌虫还是雄虫均显紫褐色，证明制备的海洋线虫VTGmRNA探针具有较好的表达测定水平。本项目发表国家发明专利1项，已发表EI论文1篇，核心期刊3篇，待发表SCI论文2篇。