基于D53/SMAX1的独脚金内酯单细胞水平原位实时测定方法研究

基金项目类型：

国家自然科学基金

基金项目编号：

31570372

来源网站：

国家自然科学基金委员会

来源网址：

http://www.nsfc.gov.cn/

负责人：

肖浪涛

完成单位：

湖南农业大学

中文关键词：

独脚金内酯; 单细胞; 原位实时; 测定方法;

项目类型：

面上项目

语种：

中文

开始日期：

2016-01-01

结束日期：

2019-12-31

中文摘要：

独脚金内酯（SL）作为一类新的植物激素在植物株型建成中发挥重要调控作用，目前SL研究领域的薄弱环节包括植物中SL的动态时空分布以及单细胞水平的检测等，这些问题已成为SL信号途径等前沿领域的限制因子。因此，创立优于串联质谱等现有方法的植物组织和单细胞水平的SL分析技术已成当务之急。为此，本项目拟利用SL信号途径的OsD53、AtSMAX1等转录抑制蛋白可快速响应SL信号而使自身通过泛素化途径快速降解的特性，将OsD53、AtSMAX1不同结构域对应的编码DNA序列与Venus报告基因进行融合，构建融合基因表达系统，筛选获得高效响应SL信号的SL-Degron表达系统；以SL-Degron为传感器分析SL在植物组织中的精细时空分布，并通过流式细胞仪统计原生质体数目以确定单细胞中SL与Venus荧光强度、Venus蛋白含量之间的准确数量关系，建立单细胞水平独脚金内酯的原位实时分析方法。