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荧光假单胞菌M18的基因插入突变菌株M18G的方法
- 专利权人:
- 上海交通大学
- 发明人:
- 许煜泉,葛宜和
- 申请号：
- CN200310108302.2
- 公开号：
- CN1539959A
- 申请日:
- 2003.10.30
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2004
- 代理人:
- 王锡麟`王桂忠
- 摘要：
- 一种荧光假单胞菌M18的基因插入突变菌株M18G的方法，属于基因技术领域。具体方法的步骤如下：根据大肠杆菌，铜绿假单胞菌和欧文氏菌菌种中gacA基因的保守序列，设计兼并引物用于聚合酶链反应扩增荧光假单胞菌M18基因组的gacA片段；以该片段为探针，从M18的基因组柯斯质粒文库中筛出阳性克隆；运用同源重组剔除技术和固相滤膜三亲杂交方法，获得M18菌株的gacA突变株M18G；吩嗪－1－羧酸的提取和定量测定：取发酵菌液180μl，加20μl6N盐酸酸化，震荡裂解细胞，经3倍体积的氯仿，震荡平衡5min后，12000r/min离心5min，弃去上清液和细菌碎片，取5μl下层液相，经HPLC测定吩嗪－1－羧酸的产量。通过生物发酵工程技术，该菌株可用于开发生产高效，低毒的新型生物农药。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
