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一种GFP多克隆抗体的制备方法
- 专利权人:
- 北京林业大学
- 发明人:
- 肖建伟,李瑞丽,苏泊丹,林金星
- 申请号：
- CN201510607983.X
- 公开号：
- CN105273082A
- 申请日:
- 2015.09.22
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2016
- 代理人:
- 姜彦
- 摘要：
- 本发明公开了一种GFP蛋白多克隆抗体的制备方法，首先用DNAstar软件对GFP蛋白进行抗原预测分析，选择亲水性强，抗原性指数高的两段区域作为抗原区，然后通过设计引物，用含有GFP核苷酸序列的pCAMBIA1300质粒做模板，进行扩增；把抗原基因片段连接到pET28a载体上，重组质粒转化入BL21中，筛选阳性克隆并PCR鉴定；选用日本大耳白兔，在注射抗原的同时，加入免疫佐剂刺激机体产生较强的免疫反应，对多克隆抗体兔进行双肩皮下两点和双后腿肌肉两点常规免疫；纯化IgG抗体。本发明所制备的抗体具有效价高，灵敏性好，可重复等优点，可以有效弥补现有GFP抗体的缺点和不足；可以有效降低抗体的非特异性。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
