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具有预防治疗动脉粥样硬化作用的重组蛋白表达与纯化
- 专利权人:
- 大连大学
- 发明人:
- 刘庆平,迟彦,李文哲,张英彪
- 申请号：
- CN200910187943.9
- 公开号：
- CN101775406B
- 申请日:
- 2009.10.15
- 申请国别(地区):
- CN
- 年份:
- 2012
- 代理人:
- 摘要：
- 本发明涉及人源重组蛋白的表达和纯化，具体涉及到一种具有预防治疗动脉粥样硬化作用的重组蛋白表达与纯化。通过设计一对上下游引物在已保存有β2-GPI基因片段的T载体上进行Polymerase Chain Reaction(PCR)反应扩增得到β2-GPI Domain V基因片段，并克隆到表达载体pET-32a-c(+)上，构建表达载体pET32a-DV，并将其转化至大肠杆菌rosetta-gami表达菌，然后经过异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导重组蛋白表达，并通过镍离子亲和层析柱纯化重组蛋白，western blot方法验证重组蛋白β2-GPI Domain V表达，TLC-配体实验验证重组表达β2-GPI Domain V蛋白活性，ELISA竞争性抑制试验验证重组表达β2-GPIdomain V蛋白可作为预防治疗动脉粥样硬化药物的可行性。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
