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胶质瘤细胞中高效特异表达的自杀基因腺病毒及构建方法
- 专利权人:
- 深圳市人民医院
- 发明人:
- 王浩,项威,胡继良,潘建青,王俊
- 申请号：
- CN201911171025.7
- 公开号：
- CN110964747A
- 申请日:
- 2019.26.11
- 申请国别(地区):
- CN
- 年份:
- 2020
- 代理人:
- 摘要：
- 一种胶质瘤细胞中高效特异表达的自杀基因腺病毒及构建方法,其特征在于,腺病毒通过下述方法构建,使用PCR方法克隆c‑fos基因启动子片段,将其连接到腺病毒表达载体上,在c‑fos启动子下游连接自杀基因及miR‑128互补序列,构建出腺病毒重组表达载体;将腺病毒重组表达载体转染293细胞,待细胞有出毒迹象时,收集病毒上清,利用病毒上清将病毒扩增至P3代,其后用腺病毒纯化试剂盒纯化病毒。本发明通过将miR‑128互补序列放在自杀基因的下游,正常细胞高表达miR‑128,而miR‑128互补序列可沉默miR‑128表达的目的,从而可对自杀基因在正常细胞中的表达发挥抑制效果,而胶质瘤细胞中miR‑128表达缺失,自杀基因可以在胶质瘤细胞中大量转录,从而能够进一步提高自杀基因在胶质瘤细胞中的靶向性,实现了自杀基因在胶质瘤细胞中高效且特性性的表达。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
