Federalnoe gosudarstvennoe byudzhetnoe uchrezhdenie nauki Institut bioorganicheskoj khimii im. akademikov M.M. Shemyakina i YU.A. Ovchinnikova Rossijskoj akademii nauk (IBKH RAN)
发明人:
Sokolova Irina Vladimirovna (RU),Соколова Ирина Владимировна (RU),Vorobeva Tatyana Vladimirovna (RU),Воробьева Татьяна Владимировна (RU),Kosarev Sergej Anatolevich (RU),Косарев Сергей Анатольевич (RU),Sokolova Irina Vladimirovna,Соколова Ирина Владимировна,Vorobeva Tatyana Vladimirovna,Воробьева Татьяна Владимировна,Kosarev Sergej Anatolevich,Косарев Сергей Анатольевич,Shibanova Elena Dmitrievna,Ши
申请号：
RU2016138803
公开号：
RU0002634408C1
申请日:
2016.10.03
申请国别(地区):
RU
年份:
2017
代理人:
摘要：
FIELD: biotechnology.SUBSTANCE: method involves cultivation of the E. coli strain B121 (DE3)/pEGT1/H1.3S producing the target protein, biomass disintegration, target protein extraction with perchloric acid, and subsequent purification of the target protein. This method is characterized by protein purification involving purification by cation exchange chromatography using washing of a sorbent coated with protein with a solution of 4 M urea and purification by HPLC. This method also comprises concentration of the purified bismethionylhistone by ultrafiltration and lyophilization to obtain a purified bismethionylhistone powder with a purity of 98.5%.EFFECT: preparation of bismethionylgystone of compendial grade.2 exИзобретение относится к области биохимии и биотехнологии, в частности к способу получения активной фармацевтической субстанции рекомбинантного бисметионилгистона Н1.3. Настоящий способ предусматривает культивирование штамма-продуцента E. coli B121(DE3)/pEGT1/H1.3S, продуцирующего целевой белок, разрушение биомассы дезинтегратором, экстракцию целевого белка перхлорной кислотой и последующую очистку целевого белка. Указанный способ отличается тем, что очистка белка включает очистку методом катионообменной хроматографии с использованием промывки сорбента с нанесенным белком раствором 4 М мочевины и очистку методом ВЭЖХ. Настоящий способ также включает концентрирование очищенного бисметионилгистона ультрафильтрацией и лиофилизацию с получением порошка очищенного бисметионилгистона фармакопейного качества с чистотой 98,5%. Настоящее изобретение позволяет получать бисметионилгистон Н1.3 фармакопейного качества. 2 пр.
