乙型肝炎病毒感染性复制子构建及其意义

• 全文链接
• 请求原文

作   者：

卢银平;  董继华;  刘朝;  陆蒙吉;  杨东亮; 

作者机构：

德国埃森大学病毒学研究所;  华中科技大学同济医学院附属同济医院临床免疫研究室;  华中科技大学同济医学院附属协和医院病毒研究室; 

关键词：

乙型肝炎病毒(HBV);  复制;  表达;  复制子; 

期刊名称：

中国公共卫生

i s s n：

1001-0580

年卷期：

2008 年 06 期

页   码：

687-689

摘   要：

目的构建乙型肝炎病毒(HBV)感染性复制子表达载体,建立HBV体外复制细胞模型,分析其复制特性及对抗病毒药物的敏感性。方法以质粒pHBV-dimer为模板,采用PCR结合限制性酶切的方法分步将1.3拷贝HBV基因组克隆到pCR2.1载体。将构建的pHBV1.3质粒转染Huh7细胞,ELISA检测不同时间HBsAg、HBeAg的表达,Southern Blot和Northern Blot分析HBV复制中间体、转录物。并利用该细胞模型进行阿德福韦抗病毒研究。结果成功构建了HBV感染性复制子表达质粒,该质粒上HBV基因能在Huh7细胞中进行有效复制、转录和表达,并能在体外短期传代12 d。阿德福韦能体外抑制该HBV复制子的复制,抑制程度依赖于药物浓度。结论新构建的HBV感染性复制子表达载体可介导高水平病毒复制,可用于HBV复制机制和抗病毒等方面的研究。