基于P72、MGF和CD2v基因的非洲猪瘟三重荧光定量PCR检测方法的建立

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作   者：

张红云;  陈秋英;  严斯刚;  杜泓明;  陆志翔;  郑敏;  罗廷荣; 

作者机构：

广西大学动物科学技术学院;  广西大学生命科学与技术学院;  广西璞缔恩葳生物技术有限公司;  广西悦牧生物科技有限公司;  柳州市动物疫病预防控制中心;  广西动物疫病预防控制中心; 

关键词：

基因缺失毒株;  检测方法;  野毒株;  三重荧光定量PCR;  非洲猪瘟; 

期刊名称：

广西农学报

i s s n：

1003-4374

年卷期：

2023 年 38 卷 01 期

页   码：

32-39

摘   要：

非洲猪瘟在临床上出现多种毒株，主要分为野毒株和基因变异毒株。因其在临床上造成不同程度的危害，有必要建立一种方法进行正确诊断和健康监测。为实现野毒株和基因变异毒株的鉴别诊断，研究根据GenBank中的ASFV中国流行株（登录号：MK333180.1）的P72、CD2v、MGF基因保守序列设计引物，建立一种可以同时检测上述三种基因的三重荧光定量PCR方法。三重荧光定量PCR方法对猪细小病毒（PPV）、猪伪狂犬病病毒2型（PRV）和猪圆环病毒（PCV2）检测均无交叉反应，表现出较强的特异性。敏感性检测显示针对P72、CD2v和MGF重组质粒标准品的最低检测下限为10~3～10~2 copies/mL。在重复性试验中，大部分组间变异系数均小于2%或接近2%，具有较好的重复性。试验表明，三重荧光定量PCR方法可用来鉴别野毒株和基因变异毒株。