马铃薯Y病毒衣壳蛋白的原核表达及抗血清制备

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作   者：

王玉;  黄显德;  魏代福;  温亮;  杨举田;  陈秀斋;  田延平; 

作者机构：

临沂市烟草公司;  山东农业大学植物保护学院;  山东省农业微生物重点实验室; 

关键词：

原核表达;  抗血清制备;  马铃薯Y病毒;  衣壳蛋白; 

期刊名称：

山东农业科学

基金项目：

马铃薯与烟草脉带花叶病毒P3N-PIPO互作蛋白的鉴定与功能分析
作物免疫调控与物理防控技术及产品研发

i s s n：

1001-4942

年卷期：

2018 年 01 期

页   码：

111-114

摘   要：

采用RT-PCR方法扩增马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)衣壳蛋白(coat protein,CP)基因,将其连接到原核表达载体pEHISTEV上,获得重组质粒pEHISTEV-PVY-CP,转化大肠杆菌Rosetta,经IPTG诱导后,可以表达出分子量为35 k D的融合蛋白。切胶回收融合蛋白,免疫新西兰大耳兔制备PVY CP抗血清。间接ELISA结果表明,该抗血清的效价为1∶16384,Western blot分析表明该抗血清只与感染PVY的普通烟植株有特异性反应,而与健康普通烟和感染PVX的普通烟植株无反应。本研究为PVY的血清学检测以及早期预警奠定了基础。