基于ITS基因的三七PC R分子鉴定方法

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作   者：

夏晖;  张芹;  吴弘;  季超;  陈怡;  原楚妍;  孙星宇;  郑文杰; 

作者机构：

云南农业大学植物保护学院;  天津师范大学生命科学学院; 

关键词：

三七;  聚合酶链式反应;  鉴别;  检测;  ITS基因; 

期刊名称：

食品研究与开发

i s s n：

1005-6521

年卷期：

2022 年 43 卷 004 期

页   码：

181-187

摘   要：

为鉴定食品中的三七源性成分,以内转录间隔区(internal transcribed spacer,ITS)序列作为DNA条形码来进行分析.该研究首先比较十六烷基三甲基溴化铵(cetyltrimethylammonium bromide,CTAB)法、十二烷基硫酸钠(sodium dodecyl sulfate,SDS)法和磁珠法3种常用DNA提取方法提取三七及其他植物样品DNA的效果(浓度、纯度),然后根据三七及其近缘植物ITS序列中的保守区域设计三七的特异性引物,建立一种针对三七鉴定的快速、特异、灵敏的聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)方法.对与三七相似或近缘的植物进行特异性试验,并利用三七与常见相似植物的混合样本进行PCR扩增测试该方法的灵敏度.结果显示:3种提取方法所得DNA扩增后均可检测出清晰条带,CTAB法和磁珠法提取效果良好.利用本研究所设计的特异性引物,能够对三七进行特异性的检测,检测灵敏度为0.5%.