大肠杆菌BL21(DE3)中定向进化突变体库构建的方法比较

• 全文链接
• 请求原文

作   者：

陈菲云;  张大伟;  刘森; 

作者机构：

中国科学院天津工业生物技术研究所;  三峡大学医学院/分子生物学研究所; 

关键词：

定向进化;  酶;  突变库;  多聚质粒;  克隆转化; 

期刊名称：

生物技术世界

基金项目：

信号肽介导蛋白转运的机理研究
利用ΔSRP抑制子挖掘蛋白转运新途径的基础研究
以蛋白质相互作用为核心的生物振荡器的研究与设计
芽殖酵母细胞命运抉择网络的建模和分子调控机制研究

i s s n：

1674-2060

年卷期：

2013 年 10 期

页   码：

68-70

摘   要：

定向进化的突变体库建立是定向进化是否成功的关键因素,只有建立足够大的库容才有可能筛选到合适的突变体。然而用来做定向进化的宿主菌的转化效率并不总是那么高,难以达到建库要求。而且在以常规分子克隆方法做连接转化时,耗时长,效率低等问题也影响了突变体库的建立,高效的克隆转化方法是定向进化所需求的。本文以大肠杆菌BL21(DE3)为转化宿主菌,挑选了一种新的高效的克隆转化方法,与现在实验室常规克隆转化方法进行了比较,证明了PCR多聚质粒的克隆转化方法在定向进化突变体库构建中的优势。为定向进化突变体库的构建提供了新的高效可靠的技术方法。