禽白血病病毒双抗体夹心ELISA检测方法的建立

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作   者：

贠炳岭;  刘文;  李德龙;  秦立廷;  刘在斯;  吴关;  祁小乐;  王永强;  高宏雷;  王笑梅;  高玉龙; 

作者机构：

中国农业科学院; 

关键词：

禽白血病病毒;  双抗体夹心ELISA;  单克隆抗体;  多克隆抗体; 

期刊名称：

中国兽医科学

基金项目：

i s s n：

1673-4696

年卷期：

2012 年 09 期

页   码：

916-920

摘   要：

为建立一种快速有效的检测禽白血病病毒(ALV)的方法,以原核表达的HB09JY03(ALV-J)p27蛋白制备的单克隆抗体作为包被抗体,p27蛋白制备的多克隆抗体作为检测抗体建立了检测ALV的双抗体夹心ELISA(DAS-ELISA)方法。该方法对p27的最小检出量为1.25ng/mL,且与禽类常见的病毒鸡传染性支气管炎病毒、马立克病病毒、鸡传染性喉气管炎病毒等无交叉反应。动物感染试验结果表明,用该方法可在感染动物12d后有效检测泄殖腔分泌物中的禽白血病病毒。利用该方法检测了491份蛋清样品和180份肛拭子样品,与PCR方法的符合率分别为96.5%和93.8%。证实,该方法具有方便、快速、敏感等优点,该方法的建立为ALV的早期诊断及种鸡场的净化提供了有效工具。