脐带间充质干细胞源外泌体对瘢痕疙瘩成纤维细胞纤维化的作用

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作   者：

刘璇;  高超;  夏娜;  邹东旭;  蔡宏; 

作者机构：

解放军医学院;  空军特色医学中心皮肤科; 

关键词：

脐带间充质干细胞;  外泌体;  成纤维细胞;  转化生长因子-β/Smad通路;  瘢痕; 

期刊名称：

中华实验外科杂志

i s s n：

1001-9030

年卷期：

2022 年 39 卷 004 期

页   码：

640-643

摘   要：

目的 探讨人脐带间充质干细胞源外泌体(hucMSC-exo)对人瘢痕疙瘩成纤维细胞(HKF)生物学行为和纤维化的作用.方法 培养人脐带间充质干细胞(hucMSC),收集培养上清提取外泌体.将HKF分为对照组(NC)和实验组(Exo),对照组在培养到70%~80%融合后,用基础培养基处理;实验组用含hucMSC-exo的基础培养基处理,外泌体终质量浓度为2 μg/ml,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)、划痕实验检测细胞增殖与迁移,检测羟脯氨酸(HYP)含量,并用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)对各组转化生长因子β1(TGF-β1)、转化生长因子β2(TGF-β2)、SMAD家族蛋白2(Smad2)、SMAD家族蛋白3(Smad3)信使RNA(mRNA)水平进行分析.应用图像处理软件Image J和统计软件分析,两组间比较采用Student-t检验.结果 实验组吸光度值在处理后的每个时间点都低于对照组,0h(Exo=1.421±0.114比 NC=1.403±0.104,t=0.267,P>0.05),12 h(Exo=1.688±0.102比 NC=1.730±0.073,t=0.745,P>0.05),24 h(Exo=1.755±0.089比 NC=1.829±0.036,t=1.711,P>0.05),36 h(Exo=1.875±0.154比 NC=1.955±0.183,t=0.747,P>0.05),48 h(Exo=2.054±0.035比 NC=2.110±0.067,t=1.621,P>0.05),60 h(Exo=2.086±0.034比 NC=2.126±0.042,t=1.656,P>0.05)和72 h(Exo=2.063±0.175NC=2.094±0.065,t=0.378,P>0.05).对培养了 48 h的细胞划痕区域面积进行统计分析,实验组划痕面积为对照组0.997±0.020倍,t=0.087,P>0.05,差异无统计学意义.实验组培养上清中HYP含量低于对照组[(15.310±1.083)μg/ml比(19.560±0.737)μg/mal,t=3.243,P<0.05),结果差异有统计学意义.实验组TGF-β1、TGF-β2、Smad2、Smad3的表达量均低于对照组(TGF-β1=0.814±0.048比1.076±0.066,t=3.210,P<0.05;TGF-β2=0.925±0.037比 1.135±0.075,t=2.657,P<0.05;Smad2=0.911±0.061 比 1.139±0.075,t=2.394,P<0.05;Smad3=0.913±0.038比 1.043±0.025,t=2.850,P<0.05),结果差异有统计学意义.结论 hucMSC-exo有抑制HKF增殖迁移的趋势,并能抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞的纤维化.