多伞阿魏的冰冻切片方法建立及挥发油、香豆素类成分组织化学定位分析

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作   者：

赵媛媛;  马颖;  刘双双;  刘朦朦;  卢昕;  姚佳琦;  张思维;  朱芸; 

作者机构：

石河子大学药学院; 

关键词：

香豆素;  挥发油;  冰冻切片;  树脂道;  多伞阿魏;  蔗糖; 

期刊名称：

中国实验方剂学杂志

i s s n：

1005-9903

年卷期：

2022 年 28 卷 013 期

页   码：

161-166

摘   要：

目的:建立多伞阿魏的冰冻切片方法,并对其不同器官中挥发油和香豆素类成分进行组织化学定位研究.方法:以多伞阿魏根、茎、叶柄、叶为材料,考察蔗糖保护剂质量分数、液氮速冻时间、包埋条件、切片厚度、冷冻温度和时间、后处理方式等影响因素,对比冰冻切片的完整度、显微效果、伸卷度和清晰度,进而筛选最佳切片条件.分别利用苏丹Ⅳ染色法和荧光显微镜技术定位多伞阿魏的挥发油和香豆素类成分.结果:多伞阿魏根、茎、叶柄、叶冰冻切片的最佳条件为根以质量分数10%、15%、20%梯度蔗糖作为保护剂;茎和叶柄以质量分数10%、20%、30%梯度蔗糖作为保护剂;叶以质量分数20%、25%、30%梯度蔗糖作为保护剂;以胶水-水(2:1)作为包埋剂;液氮速冻20 s,-25℃回温30 min;-20℃下切片,切片厚度25 μm;贴片后用相同质量分数的蔗糖溶液冲洗,将切片在冰袋上静置一段时间,于常温条件下保存,其中蔗糖保护剂质量分数是最主要的影响因素.组织化学定位结果显示,多伞阿魏4种器官中挥发油和香豆素类成分均主要分布于树脂道.结论:该研究首次建立了多伞阿魏冰冻切片方法,该方法成片率高、步骤相对简化;多伞阿魏的挥发油和香豆素类成分主要积累在树脂道中.