蜂巢小甲虫气味结合蛋白基因AtOBP1的分子特性及功能研究

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作   者：

李良斌;  武丽仙;  许雅静;  刘芳;  陈大福;  刘家莉;  赵红霞; 

作者机构：

华南农业大学植物保护学院;  广东省科学院动物研究所广东省野生动物保护与利用公共实验室广东省动物保护与资源利用重点实验室;  福建农林大学动物科学学院(蜂学学院); 

关键词：

嗅觉行为;  RNAi;  AtOBP1;  气味结合蛋白;  蜂巢小甲虫; 

期刊名称：

昆虫学报

i s s n：

0454-6296

年卷期：

2023 年 66 卷 001 期

页   码：

19-26

摘   要：

[目的]本研究旨在明确蜂巢小甲虫Aethina tumida气味结合蛋白1(odorant binding protein 1,OBP1)的表达模式,分析AtOBP1在蜂巢小甲虫嗅觉识别中的作用.[方法]基于蜂巢小甲虫转录组和基因组数据库扩增AtOBP1的cDNA全长序列,并进行生物信息学分析;利用RT-qPCR检测该基因在蜂巢小甲虫不同发育阶段(卵、幼虫、蛹和雌雄成虫)、羽化后第7天成虫不同组织(头、表皮、翅、足、脂肪体、肠道、马氏管、精巢和卵巢)以及羽化后不同日龄成虫头部的表达量;采用RNA干扰技术和Y型管行为选择实验,解析AtOBP1在蜂巢小甲虫嗅觉识别中的生物学功能.[结果]AtOBP1基因(GenBank登录号:MT211982.1)的cDNA全长序列包含6个外显子,其开放阅读框(ORF)长447 bp,编码148个氨基酸残基,预测分子量和等电点分别为15.9 kD和4.73,具有PBP_GOBP亚家族的保守结构域;AtOBP1蛋白是由6个α螺旋组成的二聚体,且有6个保守的半胱氨酸形成3个二硫键;系统发育进化树显示该蛋白与鞘翅目(Coleoptera)黄粉虫Tenebrio molitor的TmOBP8聚在同一分支.RT-qPCR结果显示AtOBP1在蜂巢小甲虫蛹期及雄成虫期表达量较高,且在成虫头部和精巢中特异性高表达;AtOBP1在成虫头部的表达量随着日龄而逐渐升高,分别在羽化后第5和7天达到2个高峰,羽化后第8天降低.RNAi技术结合Y型管行为选择行为实验结果表明,沉默AtOBP1后,蜂巢小甲虫成虫对花粉挥发性化合物棕榈酸乙酯和亚麻酸乙酯的选择偏好性显著降低.[结论]蜂巢小甲虫AtOBP1属于Classical OBPs家族,AtOBP1主要在蜂巢小甲虫成虫头部和精巢中高表达而且可能参与蜂巢小甲虫对花粉挥发性化合物棕榈酸乙酯和亚麻酸乙酯的识别过程.