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一株NADC34-like猪繁殖与呼吸综合征病毒全基因组序列的分析

作   者:
隆耀平周军肖璐于吉峰张斌周泷
作者机构:
四川博策检测技术有限公司西南民族大学畜牧兽医学院四川省畜牧科学研究院
关键词:
猪繁殖与呼吸综合征病毒重组分子特征NADC34-like PRRSV
期刊名称:
中国预防兽医学报
i s s n:
1008-0589
年卷期:
2022 年 44 卷 005 期
页   码:
544-549,554
摘   要:
2017年,NADC34-like猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)自北美传入我国后,迄今未见该类病毒与我国本土 HP-PRRSV发生重组的报道.为监测该类病毒在四川地区的流行变异情况,本研究从该地区某疑似感染PRRSV发病猪场采集肺脏样品,经ORF5基因分型RT-PCR检测并测序结果显示,该猪场为NADC34-like PRRSV感染.将阳性样品接种至猪肺泡巨噬细胞(PAMs)进行病毒分离,并通过RT-PCR扩增、测序及间接免疫荧光试验(IFA)鉴定结果显示,分离到一株NADC34-likePRRSV,并命名为SCcd2020株.经PCR分段扩增病毒全基因组,测序、拼接后的结果显示,病毒基因组全长15 020 bp.为进一步分析SCcd2020株的遗传演化特征,利用MegAlign分析SCcd2020株全基因组及ORF5基因序列与GenBank中12株PRRSV参考株相应基因的核苷酸及其编码氨基酸序列的相似性;采用MEGA X软件利用NJ法构建SCcd2020株的全基因组及ORF5基因的系统发育树;采用MegAlign分析SCcd2020株Nsp2氨基酸序列的缺失特征;分别利用RDP4、SimPlot软件对SCcd2020株进行重组分析.相似性分析结果显示,SCcd2020株与12株代表PRRSV ORF5基因序列及其编码氨基酸序列的相似性分别为 84.4%~97.0%与 84.6%~97.0%,其中与 IA/2014/NADC34 株相似性最高为 97%;SCcd2020株与 12株PRRSV 代表株全基因组序列的相似性为79.8%~89.2%,其中与NADC30株相似性最高为89.2%;ORF5基因进化树结果显示,SCcd2020株与NADC34-like PRRSV聚为一大支;而全基因组进化树结果显示,SCcd2020株与NADC30-like PRRSV聚为一大支.Nsp2氨基酸序列分析结果显示,SCcd2020株该区域存在"111+1+19aa"缺失模式,而NADC34-likePRRSV为"100aa"缺失模式;上述结果表明,SCcd2020株基因组可能发生了重组.重组分析结果结果显示,SCcd2020株是由NADC30-like PRRSV、HP-PRRSV以及NADC34-like PRRSV之间形成的重组病毒.综上所述,SCcd2020株为国内首次报道与我国本土 HP-PRRSV发生复杂重组的NADC34-like PRRSV,表明我国PRRSV遗传多样性进一步增加,应高度重视.本研究结果有助于深入了解我国NADC34-like PRRSV的遗传演化特征,为科学防控该类病毒的感染提供参考依据与数据支持.
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