连接肽对融合蛋白ELP[I]₃₀-linker-eGFP相变的影响

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作   者：

张立超;  李军明;  葛高顺;  孔令岭;  胡学军; 

作者机构：

大连大学医学院; 

关键词：

类弹性蛋白;  绿色荧光蛋白;  纯化标签;  融合蛋白;  连接肽; 

期刊名称：

生命科学研究

基金项目：

单链抗体在大肠杆菌体内定点糖基化及通过糖链以共价键定向固定的研究

i s s n：

1007-7847

年卷期：

2013 年 005 期

页   码：

401-405

摘   要：

研究G4S和Poly N连接肽对融合蛋白ELP[I]30-linker-eGFP相变的影响.将编码两种不同连接肽G4S和Poly N的绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,eGFP)基因克隆到pET28-ELP[I]30表达载体中,在宿主菌E.coli BLR(DE3)中经IPTG诱导表达ELP[I]30-linker-eGFP,通过可逆相变循环(inverse transition cycling,ITC)及镍柱亲和层析纯化ELP[I]30-linker-eGFP蛋白.结果显示,成功构建、表达具有活性的两种连接肽的融合蛋白ELP[I]30-linker-eGFP,连接肽G4S使融合蛋白产生不可逆相变,而Poly N不影响融合蛋白可逆相变,该研究对类弹性蛋白标签的应用具有指导意义.