奶牛乳房炎源乳房链球菌的分离鉴定及部分生物学特性分析

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作   者：

许淑芸;  王巧梅;  俞杰;  周霞;  吴洁;  王晓兰;  刘良波;  张辉; 

作者机构：

石河子大学科技学院;  新疆生产建设兵团第八师畜牧兽医工作站; 

关键词：

致病性;  奶牛乳房炎;  耐药性分析;  生物被膜;  耐药基因;  毒力基因;  乳房链球菌; 

期刊名称：

黑龙江畜牧兽医

i s s n：

1004-7034

年卷期：

2024 年 018 期

页   码：

75-84,133-134

摘   要：

为确定引起新疆维吾尔自治区某奶牛场患慢性乳房炎奶牛的病原,试验采集患慢性乳房炎奶牛的乳样进行细菌的分离,并对分离菌进行16S rDNA基因序列分析、多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)、毒力基因和耐药基因检测、耐药性分析、生物被膜(bacterial biofilm,BF)形成能力测定及致病性试验.结果表明:分离鉴定到4株乳房链球菌(BS-1、BS-2、BS-3、Gan-3株);其中BS-1株16S rDNA基因序列与GenBank中乳房链球菌参考株核苷酸相似性在92.30%~96.80%之间,BS-2、BS-3、Gan-3株16S rDNA基因序列与GenBank中乳房链球菌参考株核苷酸相似性在99.50%~100%之间;BS-1和BS-3株序列型为ST18,BS-2和Gan-3株序列型为ST20;4株分离菌均携带毒力基因 hasA、hasB、hasC、sua、pauA、acdA、fpb、slp 和 skc,BS-1、BS-2 和 BS-3 株携带毒力基因 gapC,BS-1、BS-2 和Gan-3株携带毒力基因oppF,4株分离菌均未携带毒力基因bac、lmb、cyl、glnA、hylB、lbp、cfu、cfb.4株分离菌均携带耐药基因 TEM-89,均未携带耐药基因 ermA、ermB、mefA、mphB、tetM、tetO、tetL、tetK、tetS、tetT、pap2b;对头孢噻吩、氨苄西林、阿莫西林、头孢曲松、头孢吡肟、红霉素、链霉素、庆大霉素、恩诺沙星、环丙沙星、万古霉素和利福平的耐药率为100%,对青霉素、左氧氟沙星和氯霉素的耐药率为75%,对卡那霉素、四环素和克林霉素的耐药率为50%,对头孢西丁和阿奇霉素的耐药率为25%;其中BS-1株对头孢西丁、阿奇霉素、阿米卡星、左氧氟沙星和克林霉素敏感,BS-2株对头孢西丁、阿奇霉素、卡那霉素、阿米卡星和氯霉素敏感,BS-3株对青霉素、阿米卡星、四环素敏感,Gan-3株对头孢西丁、阿奇霉素、卡那霉素、四环素和克林霉素敏感.Gan-3株培养8 h和12 h后有弱生物被膜形成;BS-1、BS-2和BS-3 株培养 6 h、8 h、12 h、24 h、36 h、48 h、60 h 后及 Gan-3 株培养 6 h、24 h、36 h、48 h、60 h 后均无生物被膜形成.除了BS-1株外,其他3株分离菌均会引起小鼠死亡.接种4株分离菌的小鼠剖检可见肝脏、肾脏有明显出血点,肾脏和脾脏肿大,心脏淤血、肿大,胸腔淤血.病理变化均呈现为肺脏充血,出现间质性肺炎,肺泡间隔增宽,炎性细胞增多;肝脏中央静脉淤血,肝索变窄,肝窦少量淤血;肾小球毛细血管网充血、毛细血管增生,肾间质充血,间质静脉充血;心肌纤维断裂,心肌细胞萎缩.说明引起该奶牛场奶牛患慢性乳房炎的病原为乳房链球菌,分离到的4株乳房链球菌携带多种毒力基因,对小鼠表现出明显的致病性,且对不同抗生素的耐药性不同.