GⅡ.4诺如病毒P结构域单克隆抗体的制备与鉴定

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作   者：

侯玉珍;  张婷;  胡贵方;  张绪富;  郭伦爱;  戴迎春; 

作者机构：

南方医科大学公共卫生学院流行病学系;  南方医科大学中医药学院中西医结合基础教研室; 

关键词：

变异株;  单克隆抗体(mAb);  联合免疫;  GⅡ.4诺如病毒; 

期刊名称：

细胞与分子免疫学杂志

基金项目：

诺如病毒的功能性共受体鉴定及石榴皮有效部位的抗病毒机制研究

i s s n：

1007-8738

年卷期：

2020 年 008 期

页   码：

734-739

摘   要：

目的通过多个基因簇变异株联合免疫的方式制备抗GⅡ.4型诺如病毒(NoV)P结构域单克隆抗体(mAb).方法用复合抗原GⅡ.4型NoV/1996(VA387)、2004、2006b和2010基因簇P颗粒免疫BALB/c小鼠,将成功免疫的小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,通过ELISA筛选出阳性杂交瘤细胞,采用有限稀释法制备mAb并进行纯化, ELISA检测mAb效价和特异性,亚类试剂盒鉴定抗体亚类, NoV P颗粒-HBGA结合阻断实验检测mAb中和能力.结果筛选出13株稳定分泌抗GⅡ.4型NoV P颗粒mAb的杂交瘤细胞株,纯化后的13株mAb效价均在10-4以上,属于IgG1型,且均与不同GⅡ.4型NoV变异株具有结合能力;其中5株mAb与GⅡ.17、GⅡ.3和GⅡ.6型NoV具有结合能力, 3株mAb与GⅡ.2型NoV具有结合能力且具有人类组织血型抗原(HBGA)受体阻断能力.结论通过NoV多个基因簇变异株联合免疫,成功制备出抗GⅡ.4型NoVP结构域的mAb,为基于P颗粒的GⅡ.4型NoV诊断、疫苗及抗体药物的研发奠定了基础.