转录因子Bach2的构建及表达

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作   者：

庞珍珍;  马学峰; 

作者机构：

大连医科大学附属大连市中心医院消化内镜一室;  浙江省人民医院检验中心; 

关键词：

免疫性疾病;  慢病毒;  Bach2基因; 

期刊名称：

中国卫生检验杂志

i s s n：

1004-8685

年卷期：

2016 年 26 卷 01 期

页   码：

101-103

摘   要：

目的构建高效表达人Bach2基因的慢病毒重组质粒,并探索其在免疫疾病中的机制。方法取健康人外周血分离单个核细胞并提取总RNA逆转录为c DNA,扩增Bach2基因CDS序列,插入p LVX-IRES-Zs Green1慢病毒质粒。磷酸钙共转染法包装慢病毒,感染人HEK293T细胞。空白质粒感染HEK293T细胞作为对照。免疫印迹分析空白质粒和过表达质粒HEK293T细胞中Bach2基因表达。结果 PCR结果显示,Bach2成功插进p LVX-IRES-Zs Green1质粒中,real-time PCR以及Western blot证实,Bach2基因成功在HEK293T细胞中高效表达。结论成功构建高效表达Bach2基因的慢病毒穿梭质粒,并成功在HEK293T细胞表达。