凡纳滨对虾致病性雷氏普罗威登斯菌的分离鉴定及中草药对其体外抑菌效果研究

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作   者：

高晓华;  何兰;  邵玲; 

作者机构：

上海市水产研究所上海市水产技术推广站; 

关键词：

中草药;  耐药性;  雷氏普罗威登斯菌;  凡纳滨对虾; 

期刊名称：

中国预防兽医学报

i s s n：

1008-0589

年卷期：

2024 年 46 卷 009 期

页   码：

915-922

摘   要：

为明确引起上海青浦区某对虾养殖场凡纳滨对虾（Litopenaeus vannamei）死亡的致病原，并了解分离菌的药敏性及对中草药的敏感性等，本研究从患病凡纳滨对虾肝胰腺组织中分离纯化到一株优势菌，命名为L20230712，采用TSA培养基培养后可见圆形、边缘整齐、半透明的光滑菌落；经革兰氏染色后镜检可见，分离株L20230712为革兰氏阴性短杆菌；经VITEK-2全自动微生物鉴定仪鉴定，结果显示分离株L20230712与雷氏普罗威登斯菌（Providencia rettgeri）符合率为99%；通过16S r RNA基因的PCR扩增并测序进一步明确该分离株为P.rettgeri。对分离菌L20230712进行动物回归实验，结果显示该分离菌对凡纳滨对虾的半数致死量(LD50)为5.85×10～4cfu/m L，且可从感染组患病对虾肝胰腺组织再次分离获得与分离株L20230712生化、分子生物学特征一致的菌株。通过Kirby-Bauer（K-B）纸片扩散法检测分离株L20230712对7大类20种抗菌药物的敏感性，结果显示其对氟苯尼考、诺氟沙星2种药物敏感，对恩诺沙星等4种药物中介，对新霉素等14种药物耐药；采用牛津杯打孔法测定分离株L20230712对16种中草药提取液的敏感性，结果显示，乌梅（Fructus mume）等12种中草药提取液对分离株L20230712具有显著抑菌效果，而苦参（Radix sophorae）等4种中草药提取液则对分离株L20230712无抑制作用。进一步通过微量二倍稀释法测定分离株对6种极度敏感中草药的最小抑菌浓度（MIC）和最小杀菌浓度（MBC），结果显示，乌梅提取液对分离株L20230712的体外抑杀作用最强，其MIC和MBC分别为15.63 mg/mL、31.25 mg/mL。本研究结果表明P.rettgeri分离株L20230712为引起该养殖场凡纳滨对虾疫情的致病菌，首次证实P.rettgeri对凡纳滨对虾具有强致病性，并为P.rettgeri引起的凡纳滨对虾疾病的防控提供参考依据。