人SUMO3基因突变体(SUMO3-K11R)真核表达质粒的构建及其鉴定

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作   者：

伍权;  李文庭; 

作者机构：

安徽医科大学附属省立医院中心实验室; 

关键词：

真核表达;  SUMO3-K11R基因;  质粒;  免疫荧光; 

期刊名称：

生物技术世界

基金项目：

Plk1 磷酸化修饰Per1在肺癌发生发展过程中的功能和分子机制研究

i s s n：

1674-2060

年卷期：

2012 年 02 期

页   码：

4-6+14

摘   要：

构建人SUMO3基因K11R突变体的真核表达质粒并对其进行功能鉴定。方法:PCR扩增人SUMO3基因,将其克隆入真核表达载体pEGFP-C1内,构建含人SUMO基因K11R突变体的真核表达质粒pEGFP-SUMO3-K11R。使用真核转染,Western blot和免疫荧光实验的方法,鉴定SUMO-K11R在真核细胞中的表达和功能。结果:克隆的人SUMO-K11R基因,测序结果显示完全正确。瞬时转染真核细胞后,Western blot在预期的位置检测出目的条带,免疫荧光实验显示SUMO3-K11R突变体蛋白其功能与SUMO1蛋白相似,可作为研究SUMO1蛋白和SUMO3蛋白功能差异的有力工具。结论:成功构建了含人SUMO-K11R基因的真核表达质粒。