大腹园蛛主壶腹腺蛛丝蛋白末端结构域的克隆表达

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作   者：

贾秋品;  温睿;  李雪;  孟清; 

作者机构：

东华大学生物科学与技术研究所; 

关键词：

二级结构;  牵引丝;  大腹园蛛;  MaSp1;  锚定PCR; 

期刊名称：

生命科学研究

基金项目：

蜘蛛捕获丝蛋白质成丝机理研究

i s s n：

1007-7847

年卷期：

2019 年 03 期

页   码：

200-207

摘   要：

牵引丝(dragline silk)由主壶腹腺蛛丝蛋白(major ampullate spidroin, MaSp)组成,是蜘蛛丝中强度最好的丝,同时具有极佳的生物相容性和可降解性,因此引起研究者的研究热潮。目前关于大腹园蛛MaSp结构和成丝机理方面的研究甚少,限制了其仿生应用。本文以大腹园蛛牵引丝的组成蛋白质之一MaSp1为研究对象,通过锚定PCR的方法首次获取了大腹园蛛MaSp1 NT的完整编码基因,并对其进行了克隆、表达、纯化,产量可达60 mg/L;同时对该MaSp1的CT进行表达纯化,产量可达80 mg/L。另外,通过CD色谱分析了MaSp1 NT和CT的二级结构,结果表明二者的二级结构均以α-螺旋为主。上述结果为大腹园蛛MaSp1的结构和成丝机理研究奠定了基础。