罗非鱼TRAF3基因的表达及功能研究

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作   者：

夏洪丽;  汪志文;  黎源;  陈文捷;  龙梦;  喻大鹏;  程俊;  夏立群;  鲁义善; 

作者机构：

广东海洋大学水产学院广东省水产动物病害防控与健康养殖重点实验室;  广东海洋大学深圳研究院广东省水生动物健康评估工程技术研究中心深圳海水经济动物种苗健康评价公共技术服务平台; 

关键词：

NF-κB信号;  TRAF3;  尼罗罗非鱼;  免疫反应; 

期刊名称：

水生生物学报

i s s n：

1000-3207

年卷期：

2023 年 47 卷 002 期

页   码：

308-315

摘   要：

肿瘤坏死因子受体(TNFR)相关因子3(TRAF3)是多种免疫途径中的关键调控因子.从尼罗罗非鱼(Oreo-chromis niloticus)中克隆获得了TRAF3基因,命名为OnTRAF3(GeneBank No.MN258118),该基因包含1个环指结构域、1个锌指结构域、1个卷曲螺旋和MATH结构域.多序列比对表明,OnTRAF3与其他己知的TRAF3蛋白具有高度的相似性,尤其是MATH结构域.实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析显示,OnTRAF3在各组织中广泛分布,且在脑、皮肤、肠和鳃中表达量较高.在无乳链球菌诱导后,多个组织中的OnTRAF3表达量出现了不同程度的上调,说明OnTRAF3参与了罗非鱼的抗菌免疫应答.亚细胞定位实验显示,OnTRAF3分布在HEK293的细胞质和细胞核中.此外,荧光素酶报告基因实验结果显示,野生型(WT)On-TRAF3可显著激活NF-κB信号,而coiled-coil和MATH结构域缺失后,依然能够显著激活NF-κB活性,而RING和Zinc缺失后,该激活作用则明显减弱,表明RING和Zinc结构域是OnTRAF3在免疫信号通路中行使功能的关键结构域.研究为探索TRAF3在罗非鱼免疫应答中的功能提供了重要的基础.