甘蓝型油菜Kunitz蛋白酶抑制剂的异源表达与理化特征分析

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作   者：

冯玮;  李朋朋;  宋鹏; 

作者机构：

聊城大学 生命科学学院;  聊城市东昌府区农业农村局; 

关键词：

油菜籽Kunitz蛋白酶抑制剂;  克隆表达;  理化特征;  毕赤酵母; 

期刊名称：

浙江农业学报

i s s n：

1004-1524

年卷期：

2022 年 34 卷 001 期

页   码：

112-119

摘   要：

利用毕赤酵母表达系统首次克隆表达了一个油菜籽来源的Kunitz蛋白酶抑制剂基因(RTI;rti),分离纯化后对该抑制剂进行了理化特征分析.结果显示:在摇瓶发酵水平,重组RTI诱导表达水平达到628 mg·L-1,抑制剂比活性达到69.6 TIU·mg-1蛋白;重组RTI在30~90℃可保持70%以上抑制活性,在pH 2.0~11.0保持80%以上抑制活性;金属离子Cu2+和Co2+,有机试剂甲醇、乙醇、丙酮和氯仿对其有抑制作用;重组RTI以非竞争性抑制方式与胰蛋白酶作用,对胰蛋白酶具有很强的、专一性抑制作用,属于典型的植物Kunitz型胰蛋白酶抑制剂.结合其良好的理化特性,重组RTI具有开发为抗虫蛋白的潜力.