种子种苗上黄瓜绿斑驳花叶病毒IC-RT-PCR检测方法的建立及应用

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作   者：

任春梅;  杨柳;  缪倩;  陆芳;  季英华;  程兆榜; 

作者机构：

江苏省农业科学院植物保护研究所; 

关键词：

黄瓜绿斑驳花叶病毒;  特异性;  免疫捕获RT-PCR;  灵敏度; 

期刊名称：

植物保护

i s s n：

0529-1542

年卷期：

2022 年 005 期

页   码：

212-219

摘   要：

黄瓜绿斑驳花叶病毒（CGMMV）是一种检疫性植物病毒，种传和农事操作是其主要传播途径，因此种子和种苗的早期检测尤为重要。鉴于种子检测的特殊性及幼苗病毒含量低的特点，本试验通过制备CGMMV单克隆抗体，结合特异性引物，建立了黄瓜绿斑驳花叶病毒的IC-RT-PCR早期检测方法，比较了IC-RT-PCR与DAS-ELISA和RT-PCR方法的特异性、灵敏度，并对实际检测效果进行了评价。在操作程序上，IC-RT-PCR法与DAS-ELISA法一样简便，但灵敏度远大于DAS-ELISA。IC-RT-PCR与RT-PCR均可检出20～25 ng种子上的病毒，且特异性相当，而DAS-ELISA法只可检出10μg种子上的病毒。综上所述，IC-RT-PCR法可简便有效地应用于种子和种苗上CGMMV的检测，为病毒防治的早期干预提供技术支撑。