实时荧光定量PCR研究蛋鸡组织基因表达的内参基因筛选

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作   者：

张蓉;  施晓丽;  陈朝桂;  文光林;  赵忠海; 

作者机构：

贵州大学动物科学学院;  高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室; 

关键词：

内参基因;  NormFinder软件;  稳定性评价;  蛋鸡;  geNorm软件; 

期刊名称：

中国畜牧兽医

基金项目：

氨基葡萄糖对蛋鸡骨骼代谢和钙代谢的调控机理研究

i s s n：

1671-7236

年卷期：

2017 年 08 期

页   码：

2226-2233

摘   要：

为筛选出蛋鸡不同组织中稳定表达的内参基因,试验以120日龄的海兰灰蛋鸡(Gallus domesticus)为试验动物,选取常见内参基因RPS2、β-actin、GAPDH和HMBS作为候选基因,利用实时荧光定量PCR技术Ct值分析法对4个候选内参基因的相对表达进行测定,利用独立评价软件geNorm和NormFinder对蛋鸡的4个候选内参基因在不同组织(心脏、肝脏、肺脏、肾脏、肠、胫骨、胰脏和子宫)中的表达稳定性进行评价。结果显示,Ct值分析和geNorm程序分析均得出相似的结果,即RPS2基因始终占主导地位,稳定性最强,β-actin基因次之;NormFinder软件分析显示,HMBS基因稳定性最好,最佳组合为HMBS和RPS2基因;当分析不同组织中表达恒定的内参基因时,发现不同组织最稳定的内参基因也不完全相同。由此说明,不同的组织器官和不同的分析方法得出的结论虽然不完全一致,但它们却有着一定的潜在共性,发展趋势有一定相似性,即RPS2和β-actin基因相对稳定性更强。